Lapisan berlainan pundi hempedu adalah seperti berikut:[3]

• Epitelium, lapisan nipis sel terdekat pada bahagian dalam pundi hempedu
• Lamina propria, lapisan nipis tisu penghubung jarang (epithelium campur lamina propria membentuk mukosa)
• Muskularis, lapisan tisu otot licin yang membantu pundi hempedu mengecut, memancutkan hempedu ke dalam salur hempedu
• Perimuskular ("otot keliling") tisu berfiber, satu lapisan lain tisu penyambung
• Serosa, penutup luaran pundi hempedu yang datang dari peritoneum, yang merupakan lapik rongga badan

Tidak seperti salur usus lain, pundi hempedu tidak memiliki muskularis mukosa.